H₂DCFDA (2′,7′-дихлородигидрофлуоресцеин диацетат) —реагент для изучения продукции активных форм кислорода в живых клетках.
Общие свойства реагента H₂DCFDA (2′,7′-дихлородигидрофлуоресцеин диацетат)
- Молекулярная масса – 487,29,
- CAS-номер – 4091-99-0,
- брутто-формула – C₂₄H₁₆Cl₂O₇,
- название IUPAC – 2-(3,6-diacetyloxy-2,7-dichloro-9H-xanthen-9-yl)benzoic acid,
- растворимость – хорошая в ДМСО, этаноле и ДМФА,
- контроль качества – ЯМР 1H, ВЭЖХ-МС (95%),
- условия транспортировки – до трех недель при комнатной температуре,
- условия хранения – 12 месяцев с момента доставки при −20°C в темноте.
Берегите от влаги. Избегайте хранения на свету и излишних циклов заморозки-разморозки стокового раствора. При многократном использовании настоятельно рекомендуется хранить реагент в атмосфере сухого аргона.
Спектральные свойства реагента H2DCFDA (2′,7′-дихлородигидрофлуоресцеин диацетат)
- Максимум возбуждения/поглощения, нм – 511,
- ε, л⋅моль⁻¹⋅см⁻¹ – 118626
- длина волны флуоресценции, нм – 533,
- квантовый выход флуоресценции – 0,76,
- CF260 – 0,17,
- CF280 – 0,14.
Рекомендации по использованию реагента H2DCFDA (2′,7′-дихлородигидрофлуоресцеин диацетат)
- Используйте свежеприготовленный раствор реагента (из-за постепенного окисления реагента рабочий раствор не предназначен для долговременного хранения).
- Необходимо подобрать оптимальную рабочую концентрацию реагента и время инкубации, необходимое для деацетилирования и окисления реагента, для клеточной линии и условий эксперимента. Если для используемой клеточной линии нет рекомендуемых протоколов, начните с концентрации в диапазоне 1-10 мкМ и времени инкубации ~30 минут.
- Не инкубируйте краситель с клетками в присутствии сыворотки, так как она содержит ферменты, расщепляющие H₂DCFDA.
