Флуоресцентный краситель, свободно проникающий через клеточные мембраны без использования дополнительных детергентов и концентрирующийся в органеллах с низким значением pH, например, лизосомах.
Основные характеристики красителя:
- максимум поглощения при 504 нм,
- максимум флуоресценции при 511 нм,
- поставляется в виде 1 мМ раствора в диметилсульфоксиде (ДМСО).
Особенности красителя:
В отличие от 2,4-динитрофенола (ДНФ, DNP), этот краситель не требует использования антител для визуализации органелл. В структуру молекулы LumiTracker Lyso Green входит бордипиррометен (BDP), что придает ей выраженные гидрофобные свойства и обеспечивает хорошую проникающую способность через мембрану клетки. Кроме этого, краситель содержит в своей структуре аминогруппу, которая выступает в роли слабого основания. В нейтральной среде она не полностью протонирована, и молекула красителя остается относительно нейтральной, что способствует лучшему проникновению через клеточную мембрану. Предположительно, попадая в лизосомы с кислой средой, краситель протонируется и таким образом удерживается в составе органеллы с низким значением pH.Рекомендации по применению красителя:
Мечение живых клеток проводится с использованием наномолярных концентраций LumiTracker Lyso Green, и окрашивание проходит в течение нескольких минут. LumiTracker Lyso Green может влиять на лизосомальный pH, так что более длительная инкубация может вызвать его повышение, поэтому окрашивание рекомендуется проводить в течение 3-7 минут при + 37 °C (в зависимости от клеточной линии и протокола окрашивания) перед визуализацией с использованием флуоресцентной микроскопии. В зависимости от клеточной линии может потребоваться увеличить концентрацию и (или) время окрашивания.Условия и срок хранения: 12 месяцев (с момента доставки) при − 20 °C в темноте. Транспортировка: до трех недель при комнатной температуре, беречь от влаги, избегать хранения на свету и излишних циклов заморозки-разморозки, при возможности хранить в аликвотах для однократного использования.
