Бензаза (бензонуклеаза) — это нуклеаза, расщепляющая все формы как ДНК, так и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые). Фермент эффективен в широком диапазоне рабочих условий. Оптимальное значение pH для активности фермента составляет от 8,0 до 9,2. Бензонуклеаза гидролизует фосфодиэфирные связи, что приводит к образованию олигодезоксинуклеотидов с концевыми 5’-монофосфатами длиной 3-5 оснований.
Применение бензазы (бензонуклеазы)
Бензаза (бензонуклеаза) идеальна для широкого спектра применений, где желательно полное расщепление нуклеиновых кислот:
- для гидролиза природных или денатурированных нагреванием ДНК и РНК,
- для удаления нуклеиновых кислот во время экстракции белка: бензонуклеаза уменьшает вязкость образца и облегчает последующие операции по очистке рекомбинантного белка или экстракции белка из образцов клеток тканей,
- для удаления нуклеиновой кислоты из клеточного или бактериального лизата, снижения вязкости раствора и увеличения выхода белка,
- для удаления примесей нуклеиновых кислот из препаратов рекомбинантного белка для подготовки образцов для двумерного гель-электрофореза белков,
- для предотвращения слипания клеток в клеточной смеси,
- для расщепление нуклеиновых кислот для облегчения получения высококачественных телец включения перед ренатурацией нерастворимых белков,
- для удаления загрязнения ДНК при приготовлении проб вакцины и вируса.
Единица активности бензазы (бензонуклеазы)
За единицу активности бензазы (бензонуклеазы) принимают количество фермента, превращающего 50 мкг ДНК спермы лосося в нуклеотиды за 30 минут при 37 °C в реакционном буфере: 50 мМ Трис-HСl, pH 8,0 и 1 мМ MgCl₂.
| CAS No | 9025-65-4 |
| Чистота | ≥ 99% (SDS-PAGE) |
| Концентрация | 250 ед./мкл |
| Молекулярный вес (кДа) | 30 000 |
| Источник | Рекомбинантный белок полученный из E. coli |
| Оптимальная реакционная температура | 20 - 37 °С |
| Оптимальный реакционный буфер | 50 мМ Трис-HСl, 1 мМ MgCl₂, 50 - 150 мМ NaCl, pH 8,0 |
| Токсичность | атоксичный |
| Условия хранения | 50 мМ Трис-HCl, pH 8,0, 50 мМ NaCl, 5 мМ MgCl₂ и 50% глицерин |
| Температура хранения | -20 °C |
