Иммуноферментный тест для количественного определения опухолевого антигена СА 19.9 в сыворотке крови человека. В нем использованы высокоаффинные и специфичные антитела (меченые ферментом и биотинилированные) с распознаванием различных и определенных эпитопов. В наборе используется высокоаффинная система биотин-стрептавидин. В лунках микропланшета находится стрептавидин. При первой инкубации образцы сыворотки, калибраторы или контроли и ферментный конъюгат В (биотинилированные антитела к CA 19-9) смешиваются, образуя при этом структуру типа «сэндвич», связанную с поверхностью лунок за счет взаимодействия биотина с иммобилизированным стрептавидином. После инкубации несвязавшийся конъюгат и моноклональные антитела удаляют промывкой, и добавляют конъюгат Е. Ферментный конъюгат связывается с иммобилизированным комплексом антиген-антитело, образуя финальный «сэндвич» комплекс. После инкубации избыток конъюгата удаляют промывкой. Добавление в лунки субстрата приводит к образованию окрашенного в синий продукта, который меняет цвет на желтый при добавлении стоп-реагента, вносимого для остановки реакции. Интенсивность окраски прямо пропорциональна CA 19-9 в образце. Оптическая плотность калибраторов и образцов измеряется при помощи специальных фотометров для микропланшетов или автоматических анализаторов (например, приборы линии HumaReader или ELISYS производства фирмы HUMAN) при длине 450 нм. Численное значение концентрации определяется с помощью калибровочной кривой, построенной по калибраторам с известной концентрацией CA 19-9, входящим в состав набора
