Тест основан на методе двухстадийного непрямого иммуноферментного анализа. Антигенный материал, представляющий собой дериват клеточной культуры, зараженной ВПГ первого и второго типа, адсорбирован на лунках микропланшета. При внесении в лунки контролей и проб, находящиеся в них антитела к ВПГ связываются с иммобилизованным антигеном. После промывки, удаляющей не связавшиеся компоненты сывороток, в лунки добавляется конъюгат, представляющий собой антитела к IgM человека, меченые пероксидазой хрена (HRP). В результате инкубации на поверхности лунок образуется комплекс: Антиген ВПГанти-ВПГ-IgMанти-IgM антитела-HRP. Буфер для разведения проб содержит антитела к IgG человека для предотвращения влияния ревматоидного фактора и устранения конкуренции специфического IgG за связывание с антигеном. После повторной промывки, удаляющей не связавшийся конъюгат, в лунки вносится субстрат. Ферментативная реакция пероксидазы с субстратом ТМБ приводит к образованию окрашенного продукта, интенсивность окраски которого пропорциональна уровню IgM к ВПГ в пробе и может быть определена фотометрированием при 450 нм. Результат интерпретируется при сравнении с расчетным значением уровня отсечения cut-off