Компания:
SibEnzyme Особенности:
Эндонуклеазы рестрикции
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
TGGCCA TGG↑CCA
ACCGGT ACC↓GGT
Источник: Microbacterium oxydans
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (dcm-)
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10 25 100 75 25 75
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 200 mM KCl, 0,1 mM EDTA, 200 ug/ml BSA, 7 mM2-меркаптоэтанол, 50% глицерин, Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента около 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Более полная сшивка достигается при добавлении 10 % ПЭГ.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dcm-метилированием (CmCWGG): TGGCCAGG.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O.
TGGCCA TGG↑CCA
ACCGGT ACC↓GGT
Источник: Microbacterium oxydans
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (dcm-)
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10 25 100 75 25 75
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 200 mM KCl, 0,1 mM EDTA, 200 ug/ml BSA, 7 mM2-меркаптоэтанол, 50% глицерин, Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента около 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Более полная сшивка достигается при добавлении 10 % ПЭГ.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dcm-метилированием (CmCWGG): TGGCCAGG.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O.
