Компания:
SibEnzyme Особенности:
Эндонуклеазы рестрикции
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
TGATCA T↑GATCA
ACTAGT ACTAG↓T
Источник: Kurthia species 22
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер 2K
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
50 75 50 50 25 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 250 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 200 ug/ml BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин, Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гиролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании Dam-метилированием (GmATC): TGATCA.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер 2K, BSA.
Примечание:
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
TGATCA T↑GATCA
ACTAGT ACTAG↓T
Источник: Kurthia species 22
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер 2K
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
50 75 50 50 25 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 250 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 200 ug/ml BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин, Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гиролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании Dam-метилированием (GmATC): TGATCA.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер 2K, BSA.
Примечание:
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
