Компания:
SibEnzyme Особенности:
Эндонуклеазы рестрикции
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
CGRYCG CGRY↑CG
GCYRGC GC↓YRGC
Источник: Bacillus stearothermophilus MC
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
100 75 10 10 50 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 200 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 200 ug/ml BSA, 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 50°C.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B, BSA
Примечание:
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
CGRYCG CGRY↑CG
GCYRGC GC↓YRGC
Источник: Bacillus stearothermophilus MC
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
100 75 10 10 50 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 200 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 200 ug/ml BSA, 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 50°C.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B, BSA
Примечание:
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
