Компания:
SibEnzyme Особенности:
Эндонуклеазы рестрикции
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
CTTAAG C↑TTAAG
GAATTC GAATT↓C
Источник: Bacillus stearothermophilus AF
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10 25 75 100 25 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 200 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 200 ug/ml BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин, Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 40% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка проходит лучше.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 55°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W, BSA
Примечание:
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
CTTAAG C↑TTAAG
GAATTC GAATT↓C
Источник: Bacillus stearothermophilus AF
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10 25 75 100 25 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 200 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 200 ug/ml BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин, Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 40% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка проходит лучше.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 55°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W, BSA
Примечание:
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
