Аллергодиагностика

Тест Total IgE основан на прямом методе определения антигена ИФА. На лунках микропланшета адсорбированы моноклональные антитела к IgE человека. При первой инкубации в лунки микропланшета вносятся калибраторы, образцы сыворотки и ферментный конъюгат, содержащий антитела к IgE. В случае присутствия в образце сыворотки IgE антител, они связываются с антителами, иммобилизованными на поверхности лунок микропланшета и с антителами ферментного конъюгата, образуюя комплексы типа «сэндвич». После инкубации несвязавшийся конъюгат и моноклональные антитела удаляются промывкой. Добавление в лунки субстрата приводит к образованию окрашенного продукта, который меняет цвет на желтый при добавлении стоп-реагента, вносимого для остановки реакции. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации общего IgE в пробе. Оптическая плотность калибраторов и исследуемых образцов сыворотки измеряется фотометрически при помощи специальных микропланшетных фотометров (например, приборах линии HUMAREADER или ELISYS). Численное значение концентрации определяется с помощью калибровочной кривой

Набор стандартов на 6 постановок для построения калибровочной кривой, необходимой для количественного определения содержания аллергена

Набор калибраторов

Набор реагентов для иммуноферментного определения концентрации общего иммуноглобулина класса Е в сыворотке крови, рассчитан на проведение анализа в дубликатах 41 неизвестной, 6 калибровочных проб и 1 пробы контрольной сыворотки при одновременном использовании всех стрипов планшета (всего 96 определений). Метод определения основан на твердофазном ИФА с применением моноклональных антител. В лунках при добавлении исследуемого образца, во время первой инкубации происходит связывание молекул IgEобщ с моноклональными антителами, иммобилизованными на внутренней поверхности лунок. Во время второй инкубации конъюгат моноклональных антител к IgE человека с пероксидазой связывается с IgEобщ, иммобилизованным в ходе первой инкубации. Во время инкубации с раствором ТМБ происходит окрашивание раствора в лунках. Степень окраски прямо пропорциональна концентрации IgEобщ в анализируемых пробах

Тест RIDA® AllergyScreen (панели 1, 2, 3, 4) основан на принципе ферментного иммуноанализа на нитроцеллюлозных мембранах (иммуноблотинг). Специфические аллергены, входящие в состав панели, нанесены на поверхность нитроцеллюлозных мембран (стрипов). Присутствующие в образце пациента IgE-антител, специфичных к этим аллергенам, формируют комплекс «аллерген-антитело» на твердой фазе. С этим комплексом на второй стадии инкубируют антитела к IgE человека, конъюгированных с биотином (проявляющие антитела). Для выявления образовавшихся комплексов на третьей стадии проводится инкубация с конъюгатом стрептавидина с щелочной фосфатазой. Фермент превращает бесцветный субстрат (BCIP / NBT) в конечный продукт реакции сине-сиреневого цвета. Интенсивность окрашивания прямо пропорциональна количеству аллерген-специфических антител в сыворотке. Оценка результата производится визуально по специальному шаблону или с помощью прибора RIDA X-Screen

Тест RIDA® AllergyScreen (панели 1, 2, 3, 4) основан на принципе ферментного иммуноанализа на нитроцеллюлозных мембранах (иммуноблотинг). Специфические аллергены, входящие в состав панели, нанесены на поверхность нитроцеллюлозных мембран (стрипов). Присутствующие в образце пациента IgE-антител, специфичных к этим аллергенам, формируют комплекс «аллерген-антитело» на твердой фазе. С этим комплексом на второй стадии инкубируют антитела к IgE человека, конъюгированных с биотином (проявляющие антитела). Для выявления образовавшихся комплексов на третьей стадии проводится инкубация с конъюгатом стрептавидина с щелочной фосфатазой. Фермент превращает бесцветный субстрат (BCIP / NBT) в конечный продукт реакции сине-сиреневого цвета. Интенсивность окрашивания прямо пропорциональна количеству аллерген-специфических антител в сыворотке. Оценка результата производится визуально по специальному шаблону или с помощью прибора RIDA X-Screen

Тест RIDA® AllergyScreen (панели 1, 2, 3, 4) основан на принципе ферментного иммуноанализа на нитроцеллюлозных мембранах (иммуноблотинг). Специфические аллергены, входящие в состав панели, нанесены на поверхность нитроцеллюлозных мембран (стрипов). Присутствующие в образце пациента IgE-антител, специфичных к этим аллергенам, формируют комплекс «аллерген-антитело» на твердой фазе. С этим комплексом на второй стадии инкубируют антитела к IgE человека, конъюгированных с биотином (проявляющие антитела). Для выявления образовавшихся комплексов на третьей стадии проводится инкубация с конъюгатом стрептавидина с щелочной фосфатазой. Фермент превращает бесцветный субстрат (BCIP / NBT) в конечный продукт реакции сине-сиреневого цвета. Интенсивность окрашивания прямо пропорциональна количеству аллерген-специфических антител в сыворотке. Оценка результата производится визуально по специальному шаблону или с помощью прибора RIDA X-Screen

Тест RIDA® AllergyScreen (панели 1, 2, 3, 4) основан на принципе ферментного иммуноанализа на нитроцеллюлозных мембранах (иммуноблотинг). Специфические аллергены, входящие в состав панели, нанесены на поверхность нитроцеллюлозных мембран (стрипов). Присутствующие в образце пациента IgE-антител, специфичных к этим аллергенам, формируют комплекс «аллерген-антитело» на твердой фазе. С этим комплексом на второй стадии инкубируют антитела к IgE человека, конъюгированных с биотином (проявляющие антитела). Для выявления образовавшихся комплексов на третьей стадии проводится инкубация с конъюгатом стрептавидина с щелочной фосфатазой. Фермент превращает бесцветный субстрат (BCIP / NBT) в конечный продукт реакции сине-сиреневого цвета. Интенсивность окрашивания прямо пропорциональна количеству аллерген-специфических антител в сыворотке. Оценка результата производится визуально по специальному шаблону или с помощью прибора RIDA X-Screen

Отрицательный контроль для ИФА, во флаконе объемом 1 мл для 10 постановок

Положительный контроль для ИФА во флаконе объемом 1 мл для 10 постановок

Ферментативный аллергосорбентный тест (EAST) на специфические IgE, предназначенный для количественного измерения специфических IgE, проводится на микротитровальных планшетах. На этапе первой инкубации образцы пациентов инкубируют на дисках с иммобилизованными аллергенами. Промыванием удаляют избыток компонентов сыворотки из лунки, в то время как аллерген-специфический IgE остается связанным. Затем добавляют антитело, меченое щелочной фосфатазой, что приводит к образованию комплексов аллерген/sIgE/конъюгат антител к IgE. Снова промывают лунки, добавляют раствор субстрата (п-нитрофенилфосфата pNPP) и инкубируют с получением в итоге желтого цвета, если присутствует конъюгат. Ферментативную реакцию останавливают с помощью натрия гидроксида (NaOH), оптическую плотность (ОП) окрашенного продукта реакции измеряют спектрофотометрически на длине волны 405 нм (референсная длина волны 620 нм). Концентрация sIgE в образце пациента пропорциональна ОП. Калибровочные стандарты с известными концентрациями IgE (калиброванные по стандарту ВОЗ 75/502) анализируют одновременно с образцами пациента для получения калибровочной кривой. Неизвестные концентрации IgE в анализируемых образцах рассчитывают по данной кривой

Тестовая система Specific IgE REAST для количественного определения (в диапазоне 0.35-100 МЕ/мл) аллерген-специфических IgE-антител против биотинилированных аллергенов в сыворотке или плазме крови. Реверсивный аллергосорбентный тест основывается на методе иммуноферментного анализа типа сэндвич. На этапе первой инкубации все IgE-антитела, присутствующие в сыворотке пациента, связываются с анти-IgE-антителами, которыми сорбированы ячейки планшета. Несвязавшиеся компоненты сыворотки удаляются промывкой, тогда как IgE-антитела остаются связанными с твёрдой фазой. На этапе следующей инкубации добавляют биотинилированный аллерген и инкубируют в ячейках планшета. После следующего этапа промывки проводят детектирование связанного аллергена, используя конъюгат стрептавидин-пероксидаза хрена, образующий комплексы из специфического IgE/биотинилированного аллергена/конъюгата с пероксидазой хрена. Лунки снова промывают, добавляют раствор 3,3’,5,5’-тетраметилбензидинового ТБМ субстрата и инкубируют с получением в итоге синего цвета. Ферментная реакция останавливается добавлением 25% фосфорной кислоты, цвет меняется на желтый. Оптическую плотность (ОП) окрасившегося продукта измеряют спектрофотометрически на длине волны 450 нм (эталонная длина волны 620 нм). Концентрация sIgE в образце пациента пропорциональна оптической плотности. Калиб-рованные стандарты с известным содержанием IgE-специфических антител (калиброванные по Международному Стандарту ВОЗ 75/502) анализируют одновременно с образцами пациента для получения калибровочной кривой. Неизвестные концентрации IgE в анализируемых образцах рассчитывают по данной кривой